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2019-08-17 浏览:
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前言:近几年来弧菌在南美白对虾养殖过程中成为了一种高致病菌。弧菌是一种条件性致病菌,当养殖动物受伤、体弱、抗病力降低、环境条件恶化时,弧菌会乘虚而入,引起南美白对虾的严重疾病,甚至死亡。副溶血弧菌是其中致病力较强的一种菌。例如:副溶血弧菌在高浓度时,SOD酶、POD酶和溶菌酶活性大幅度下降,副溶血弧菌感染后破坏了虾体的免疫系统,导致免疫技能的损坏,防病,抗病能力下降,进一步导致虾体患病,甚至死亡。哈维氏弧菌通常在病灶处大量繁殖,使内脏发生严重病变,从而导致养殖动物死亡。

在弧菌防控方面,早先养殖过程中还依赖于化学合成药物或抗生素类药物来控制这些弧菌疾病的发生与流行,但在长期使用过程中,会逐渐出现一些问题。一是病因复杂,往往不能对症下药,用药存在盲目性。没有针对性。二是一些药物菌谱范围窄,预防作用弱。三是药物会在养殖动物体内残留,从而危害到食用者的健康,长期使用会带来环境污染,还会破坏水体微生态的平衡和物质循环,而且会导致大量耐药性微生物的出现。

针对以上弊端,中草药作为天然药物,具有无抗药性、无残留、无副作用、无环境污染、不引发药源性疾病,且抑菌杀菌效果明显,同时还能改善机体自身免疫力,提高抗病能力。中草药中的多糖类、生物碱类等有效活性成分既具有广泛的抗病力,又可以作为营养物质调节动物机体的抗病因子。中草药的资源丰富,种植条件,培育条件不苛刻。生长周期短。所以中草药制剂容易取得。随着科技的进步和水产上对中药的需要量大幅度提高。一些中药试剂的提取不再是单纯的熬煮。出现很多新技术,例如:真空负压提取技术,保证中草药的生物活性。超声波细胞破壁技术,提高提取物质的提取率和含量等。

聚维酮碘溶液在水产抑菌方面的应用
水产上常用的消毒剂有很多,如氯制剂,碘制剂,高锰酸钾等。碘制剂由于其自身特性被广泛应用。聚维酮碘是水产上最为常用的消毒剂。但是随着养殖业的快速发展,聚维酮碘的大量使用对养殖环境产生了深远而广泛的影响。聚维酮碘的化学性质主要表现出碘元素的特性,因此其有效成分含量是以碘元素作为计量标量的。聚维酮碘以一般有效浓度在10%左右。本次实验选用有效碘含量在10%的聚维酮碘溶液。

聚维酮碘是有机碘。有机碘因其刺激性小,低残留,持久性强等优势成为碘类消毒剂中最为常用的消毒剂。聚维酮碘对细菌,真菌,以及传染性造血器官坏死病病毒、传染性胰脏坏死病病毒、病毒性出血性败血病病毒等都有很好的防治效果。聚维酮碘对南北白对虾的安全浓度相对较高,可以达到0.78mg/L。



材料与方法

1.1实验材料
1.1.1供试材料
弧菌:从养殖南美白对虾的水体中取得水样,通过弧菌培养皿检测水中弧菌数量和发病虾的外观形态以及对虾肝胰腺中弧菌的数量来具体确定实验水样。
中草药:哈雷(大黄)加红美(五倍子)聚维酮碘10%
培养基:TCBS琼脂(硫代硫酸盐柠檬酸盐胆盐蔗糖琼脂培养基)

1.1.2实验器具
砂锅 电炉子 脱脂棉 纱布 锥形瓶 玻璃板 烧杯  试管 恒温培养箱  移液枪 三角涂布棒 培养皿 移液管等

1.2实验方法
1.2.1 平板的制作
本次实验选定的是TCBS琼脂培养基,称取89.1g于一升蒸馏水中,加热煮沸至完全溶解,冷却到55摄氏度左右,倾注平板备用。(勿需高压灭菌)

1.2.2药液的配制
 1.将哈雷,加红美药液进行倍比稀释获得的浓度依次为1mg/ml 2mg/ml 5mg/ml的稀释液,贴标签备用。
 2.把聚维酮碘溶液(10%)当做原液处理。进行倍比稀释获得浓度依次为1mg/ml 2mg/ml 5mg/ml。

1.2.3各种药物对水样的处理。
  将取来的水样平均分为10份,每份1L。取1ml不同梯度的药液稀释液于水样中,处理4个小时。然后取被处理水样做弧菌培养基。

1.2.4药物对弧菌抑制力的测定。
  采用TCBS平板计数法
  将TCBS培养基溶化后倒入培养皿中,每个培养皿中倒入25-30ml(厚度适宜,太薄不利于弧菌的培养,太厚浪费材料)。待培养基完全冷却凝固,每个培养皿中加入200ul处理过的水样,涂布均匀。并在培养皿上标注出被处理水样。同时取原水样200ul于培养皿中做为对比。

1.结果与分析
表1 四小时杀菌效果对比


2.1三种药物对弧菌作用对比图。



① 试验选用大黄哈雷(大黄提取物)、加红美(五倍子酸)、聚维酮碘溶液,这些常见杀菌药进行一个杀菌抑菌方面的比较。低浓度的加红美对弧菌的效果良好;哈雷,聚维酮聚维酮碘溶液在适宜的浓度范围内,对弧菌也有较好的抑制作用。但是作为化学药药物,并且具有较强的渗透性,所以刺激性相对于中药来说较大。
②总体来说,在相同浓度下,五倍子的抑菌效果相对来说较为明显。五倍子作为中药,有抑菌杀菌的作用,无残留,安全浓度高等优势。所以中药在水产上的将成为潮流。
以上为单一中草药提取物对比实验
针对弧菌推出的专用药物大香连,实验如下:
主要针对卤虫消毒,50ppm,半小时效果图:



专门针对弧菌的产品大香连,在半小时的药浴时间中就可以将弧菌数量控制在安全范围,所以针对以上两个实验最终得出结论,对弧菌我们既可以安全用药又可以做到无残留无刺激无耐药性,所以以后我们不会再谈(弧)色变了。